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聊一聊CAR-T的生產(chǎn)流程

發(fā)布時(shí)間: 2022-04-18  點(diǎn)擊次數(shù): 4567次
 CAR-T產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝有哪些環(huán)節(jié)?


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1)分選和凍存:用細(xì)胞分選儀對(duì)單采產(chǎn)物APH進(jìn)行T細(xì)胞分選純化,藥明巨諾的工藝能夠?qū)細(xì)胞的純度提高到99%,以保障后續(xù)工藝的穩(wěn)健性。純化的中間產(chǎn)物會(huì)經(jīng)過程序降溫儀降溫,儲(chǔ)存于氣相液氮罐,準(zhǔn)備進(jìn)入后續(xù)生產(chǎn)工藝。

2)激活:技術(shù)人員從液氮罐中取出中間產(chǎn)物后,加入激活磁珠,完成T細(xì)胞激活,并置于二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行激活培養(yǎng)。

3)轉(zhuǎn)導(dǎo):激活后的T細(xì)胞完成慢病毒載體的CAR轉(zhuǎn)導(dǎo)。慢病毒可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分裂期及非分裂期細(xì)胞,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高。其次從整合偏好性角度,慢病毒偏好整合非編碼區(qū),相對(duì)安全。

4)擴(kuò)增:轉(zhuǎn)導(dǎo)后的T細(xì)胞接種于生物反應(yīng)器進(jìn)行擴(kuò)增工序,生物反應(yīng)器采用封閉式自動(dòng)化的動(dòng)態(tài)擴(kuò)增體系,以實(shí)現(xiàn)密閉生產(chǎn)環(huán)境及動(dòng)態(tài)過程監(jiān)控,灌流模式培養(yǎng)也比較有利于細(xì)胞增殖。整個(gè)擴(kuò)增工序大概在5天左右。

5)收獲:擴(kuò)增使CAR-T細(xì)胞達(dá)到收獲標(biāo)準(zhǔn)后進(jìn)行收獲工序。收獲標(biāo)準(zhǔn)包括活細(xì)胞數(shù)、轉(zhuǎn)導(dǎo)效率、體外效價(jià)、T細(xì)胞純度。收獲工序包括清洗、去磁珠。

6)分裝:在生物安全柜內(nèi)完成,分裝的CAR-T產(chǎn)品被保存于氣相液氮罐中,放行質(zhì)檢合格后通知臨床做回輸準(zhǔn)備。

推薦產(chǎn)品:

eBioscience  CD3功能性抗體     貨號(hào)16-0037-81

eBioscience  CD28功能性抗體   貨號(hào)16-0289-81


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