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Gibco血清對(duì)胞轉(zhuǎn)染效率的影響解讀

發(fā)布時(shí)間: 2022-07-21  點(diǎn)擊次數(shù): 1211次
  傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑有一定的細(xì)胞毒性,在轉(zhuǎn)染過(guò)程由于提高細(xì)胞的通透性因而不能在培養(yǎng)基中添加抗生素如陽(yáng)離子脂質(zhì)體。帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成復(fù)合物被細(xì)胞內(nèi)吞。Gibco血清中含有大量的蛋白質(zhì),在轉(zhuǎn)染過(guò)程中,帶負(fù)電的蛋白質(zhì)可能干擾陽(yáng)離子脂質(zhì)體對(duì)核酸的吸附,影響轉(zhuǎn)染效率。另外,使用脂質(zhì)體等轉(zhuǎn)染試劑時(shí),由于含血清轉(zhuǎn)染會(huì)將血清中的蛋白帶入細(xì)胞,引發(fā)細(xì)胞毒性,導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率降低,故不能有血清轉(zhuǎn)染。這些轉(zhuǎn)染試劑要求在轉(zhuǎn)染前換無(wú)血清培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染后4-6h在更換成有血清培養(yǎng)基,這其實(shí)是為了減輕轉(zhuǎn)染造成的細(xì)胞毒性。
 
  可使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,比如納米材料試劑,轉(zhuǎn)染過(guò)程中就可以加血清,這樣也可以提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。
 
  不同細(xì)胞及轉(zhuǎn)染試劑要求轉(zhuǎn)染的條件是不同的??稍谝淮螌?shí)驗(yàn)前做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞是否加血清,對(duì)不同的細(xì)胞是有不同的影響的,有些細(xì)胞是可以有血清的,有些加Gibco血清就會(huì)受影響。所以,普通的轉(zhuǎn)染試劑一定要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)和條件優(yōu)化。
 
  細(xì)胞毒性的大小往往意味著對(duì)細(xì)胞生理活動(dòng)影響的大小。這會(huì)對(duì)相關(guān)研究數(shù)據(jù)產(chǎn)生嚴(yán)重的干擾,甚至影響研究的結(jié)論。因此,選擇一種高效方便的轉(zhuǎn)染試劑是細(xì)胞轉(zhuǎn)染成功的關(guān)鍵。

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